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三、食用菌菌种制作

3.1 母种

3.1.1.母种培养基配方

  常规马钤薯葡萄糖培养基（简称PDA）

配方为：去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。此配方广泛用于各种食用菌。

‚ 木屑200g，麦麸100g，葡萄糖20g，琼脂20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，维生素B1 10g片，水1000ml。

③  棉子壳或木屑100g，全价小鸡饲料50g，葡萄糖20g，琼脂20g,磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，硫酸钙1.5g，碳酸钙1g，维生素B1 10片，水1000ml。

④  马铃薯200g，栎木屑20g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000ml。

⑤  麦麸40g，葡萄糖或蔗糖15g，琼脂20g，水1000ml。

⑥  米糠50g，磷酸二氢钾0.3g，葡萄糖5g，琼脂20g，水1000ml。

⑦  桑葚（干）100g，麸皮或米糠50g，蔗糖20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，硫酸钙1g，琼脂20g，水1000ml。

⑧ 西瓜壳200g，棉子壳50g，蔗糖20g，硫酸镁1g，水1000ml。

⑨木屑与麸皮各一半，加入石膏粉10——20%，按料水比1：1.2拌匀，装入试管，用竹片压成斜面（适合大部分菌类菌丝的生长，该配方高压灭菌2小时，常压灭菌6小时）。

3.1.2. 母种栽培基制作

3.1.2.1. 配方、④  中所使用的马铃薯应去皮并挖去芽眼，切成约3mm厚的蒲片,放入铝锅或不锈钢锅内加入1000ml水.渚沸并保持约20——30分钟.直到马铃薯酥而不烂后用三层纱布过滤取其滤液，营养液不足是应加水补足至1000ml.然后秤取配方中要添加的各成份。在加入琼脂后放将锅放在火炉上边加热边搅拌（琼脂条状的应剪碎，提前用热水浸泡），等到琼脂溶化后即可分装试管。试管装量是整个管长度的1/5。

3.1.2.2. 配方‚ 、③、⑤、⑥、⑦、⑧等中的木屑、棉子壳、米糠饲料及桑葚、小麦、等料均要加水煮30——120分钟后取其滤液后与各自己配方中的其它原料合并，加入琼脂加热至其完全溶化，分装试管备用。

3.1.2.2. 母种培养基灭菌  装完试管后，如在装的过程中试管口粘附培养液应清除干净，等到试管口干不潮湿时用棉塞（或化纤棉）封口，使得塞子塞进试管长度约2.5--3cm，松紧以手提棉塞试管不掉不佳。             

3.1.2.3 灭菌  制作好的培养基装入试管后要及时灭菌，将试管一把7支（或更多）捆在一块，试管口用牛皮纸或二层报纸包扎好立放在手提高压锅中进行灭菌。

手提式高压锅的使用：对手提式高压锅在没有用前应先试验，方法是：先在锅内加水至锅登处，然后拧紧锅盖进行加热，烧到1.5压力后并保持30分钟，然后停止加热，使锅内压力下降到零时打开锅盖检查锅内水量消耗，在以后的灭菌使用过程中一定要加入足量的水，切忌不能烧干锅而暴裂，造成人员的伤亡。    

对手提式高压锅耗水试验后，加入适量的水，

将捆扎好的试管竖直的摆放其中，关紧盖子进行加热灭菌，同时打开排汽阀。当排汽阀内的炀手的热汽对外排放时可关闭排汽阀进行正常加热，当锅内压力上升达到1.5MPa时开始计时(温度110℃——120℃），一般持续灭菌20——30分钟（固体培养基应持续1.5--2小时）。然后停止加热，取下灭菌锅，使其自然冷却，当锅内压力下降到0.5MPa时，再打开排汽阀，排尽锅内余汽之后，慢慢把打开锅盖打开一条缝隙，让余热慢慢散发；同时试管棉塞也得到烘干，待冷却到50——60度时取出试管并摆放成斜面。

3.1.2.4.接种  把冷却凝固后的试管、引进的母种等放入接种箱及接种工具如：接种铲接种钩等放放接种箱，之后封闭接种相门用“菇宝一号”汽雾消毒剂熏蒸消毒30钟;现在推行使用|“超净工作台”，使用前台面用75%酒精擦试消毒，然后开紫外线灯、开风机小档位，20分钟后就可以关闭紫外线灯，打开照明灯即可接种（见下图）。然后双手用（接种箱的制作参见相关资料）75%酒精棉球擦试，伸入接种箱，并点燃酒灯（燃烧酒精灯用95%的酒精），将接种工具放在酒精灯火焰上进行灼烧直至烧红，待冷却后备用。对引进的母种在精酒灯火焰上方打开口棉塞，试管并在酒精灯火焰上灼烧后再进行接种。先用接种锄将母种分割成5mm长的段，再用接种铲切割5mm长的菌块挑取接种于试管斜面中央，一支母种可扩大试管生产母种50支。接完母种块后重新把试管口塞入棉塞，放在25℃左右环境下培养，一般7可长满斜面。

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